Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология



Скачать 399.59 Kb.
страница1/3
Дата02.01.2013
Размер399.59 Kb.
ТипАвтореферат
  1   2   3
На правах рукописи


Альтман Элеонора Давидовна

ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ

ПОКАЗАТЕЛЕЙ МУКОСАЛИВАРНОГО СЕКРЕТА

У ВЕТЕРАНОВ БОЕВЫХ ДЕЙСТВИЙ


14.03.09 – клиническая иммунология, аллергология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Челябинск - 2011


Работа выполнена на кафедре иммунологии и аллергологии Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития России»
Научный руководитель:

доктор медицинских наук,

профессор, Зурочка Александр Владимирович
Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук,

профессор Сашенков Сергей Львович
доктор медицинских наук,

профессор Симбирцев Андрей Семенович

Ведущая организация: Учреждение Уральского отделения Российской академии наук Институт экологии и генетики микроорганизмов г. Пермь

Защита диссертации состоится «___» ______ 2011 года в _____ часов на заседании диссертационного совета Д 208.117.03 при Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития России», по адресу 454092, г. Челябинск, ул. Воровского,64
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития России»
Автореферат разослан «___» ____________ 2011 года.
Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор медицинских наук Л.С. Латюшина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность изучения проблемы

Актуальность изучения процессов старения на уровне мукозоассоциированной ткани саливарной зоны ротовой полости определяется выраженными структурными и функциональными изменениями связанными с возрастом, а также особым положением мукозального компартмента иммунной системы в противоинфекционной защите организма.

Мукозоассоциированная лимфоидная ткань (МАЛТ) ротовой полости является первой линией обороны против колонизации слизистых мембран вирусными и бактериальными патогенами, осуществляет процессы первичного распознавания антигенов и инициацию определенного типа иммунного ответа (Тотолян А.А., Фрейдлин И.С 2001; Теплова С.Н., Алексеев Д.А., 2002; Ковальчук Л.В. 2003; Ярилин А.А., 2003; Санникова Т.Е., Марчук Г.И. с соавт., 2003; Пальцев М.А., Кветной И.М., 2009; Сотникова Н.Ю., 2009).


От момента рождения человека и до глубокой старости происходят существенные изменения центральных органов иммунной системы (тимуса), ее периферических органов (лимфоузлов, селезенки, МАЛТ), что обосновывает необходимость дифференцированной оценки иммунных параметров не только системного уровня, но и состояния отдельных компартментов мукозального иммунитета в разных возрастных периодах онтогенеза человека (Дмитриева Л.А., 2000; Данилевский Н.Ф., Леонтьев В.К. с соавт., 2001; Яшин А.Я., 2007; Anisimov V.N., 2005, 2006, 2008; Masoro E.J., Austad S.N., 2006). Эти изменения имеют свои особенности, обусловленные специфическими свойствами данных систем и органов (Скулачев В.П. 1997; Анисимов В.Н. 2000, 2008; Зайнуллин В.Г. , Москалев А.А., 2001; Боровский Е.В., 2005; Трофимов А.В., 2010; Anisimov V.N., Berstein L.M., 2008; Caballero E., 2007). Достаточно рано признаки старения начинают проявляться и на уровне мукозоассоциированной лимфоидной ткани (МАЛТ) ротовой полости, что, по мнению ряда исследователей, является надежным индикатором физиологического старения организма в целом (Карсонова М.И., Пинегин Б.В., 2003; Пальцев М.А. и др., 2009; Куликов А.В, Архипова Л.В., 2010; Evans P. et al., 2000; Vinogradova I.A. et al., 2009). Биологический секрет мукосаливарной области является весьма привлекательным материалом для фундаментальных и прикладных клинических исследований в области иммунологии, бактериологии, микробиологии, стоматологии (Григорьев И.В., Артамонов И.Д., Уланова Е.А., и др., 2003; Теплова С.Н., 2002, 2005, 2008; Ярилин А.А., 2003; Анисимов В.Н., 2008; Новосельцев В. Н., Михальский А.И., 2009).

В настоящее время имеются все технологические условия для анализа состояния молекулярно-клеточных механизмов врожденного и приобретенного иммунитета, в том числе механизмов иммунологической толерантности, иммунологических маркеров повреждения собственных клеток мукосаливарного барьера и процессов старения МАЛТ (Зурочка А.В., Хайдуков С.В., 2008; Barnett J.C., 1994; Broekmans F.J., 2007; Yamamoto H., 2007;).

Необходимость вариативного сравнения иммунологических параметров у ветеранов боевых действий старших возрастных групп, полученных при различных формах патологии со стандартными значениями, поиск иммунологических маркеров старения на уровне мукосаливарной зоны, внедрение новых современных стратегий диагностики разных форм иммунопатологии явились основанием для проведения данного исследования.

Цель исследования: анализ показателей секреторного иммунитета мукосаливарной зоны ротовой полости с определением иммунологических предикторов старения у ветеранов боевых действий старших возрастных групп.

Задачи:

1. С помощью метода проточной цитофлуориметрии оценить клеточный состав мукосаливарного секрета у изучаемого контингента.

2. Оценить состояние гуморального звена секреторного иммунитета ротовой полости на основе количественного определения уровней иммуноглобулинов основных классов и субклассов, общей активности системы комплемента и ее субкомпонентов С3А, С5А, уровней протективных компонентов слизистых (белка и муцина) у ветеранов войн разных возрастных групп.

3. Определить уровень основных регуляторных цитокинов и молекул эндогенной тревоги - аларминов в саливарном секрете у ветеранов войн старших возрастных групп.

4. На основе полученных данных построить математическую модель старения МАЛТ саливарной зоны ротовой полости у ветеранов боевых действий с определением иммунологических биомаркеров старения в разных возрастных группах.
Научная новизна исследования состоит в изучении показателей секреторного иммунитета ротовой полости у ветеранов боевых действий в возрастном аспекте. Впервые проведен цитофлуориметрический анализ популяционного состава иммуноцитов мукосаливарного секрета у ветеранов войн разного возраста, установлены характерные возраст-ассоциированные изменения. Установлено доминирующее значение факторов врожденного иммунитета при прогрессировании процессов старения на уровне мукосаливарной зоны ротовой полости. Определен баланс регуляторных цитокинов, определяющих тип иммунного ответа, у ветеранов войн пожилого и старческого возраста установлено превалирование Th2-антителоопосредованного типа иммунного ответа на уровне индуктивной зоны МАЛТ ротовой полости.

Новыми являются данные об изменении количества эндогенных сигнальных молекул повреждения собственных клеток (аларминов) в мукосаливарном секрете у ветеранов боевых действий зрелого, пожилого и старческого возраста. Отмечен достоверный рост уровня лактоферрина в изучаемых группах пожилого и старческого возраста, что может быть связано с наличием эндогенного клеточного стресса при прогрессировании процессов старения организма.

Проведен математический анализ с определением параметров секреторного иммунитета мукосаливарной зоны ротовой полости, характеризующих иммунологический профиль старения в изучаемых возрастных группах.

Теоретическое и практическое значение работы состоит в изучении процессов старения в периферическом отделе иммунной системы на уровне мукозального иммунитета ротовой полости у ветеранов войн. Выявлены основные закономерности формирования принципиально нового уровня цитокиновой и аларминовой регуляции у пациентов старших возрастных групп с преобладанием антителоопосредованного иммунного ответа. На основании многомерных статистических методов выявлены характерные для пожилого и старческого возраста иммунологические биомаркеры старения мукосаливарной зоны ротовой полости у ветеранов боевых действий, что позволит определять индивидуальные темпы старения, прогнозировать вероятность возникновения возраст-ассоциированных болезней, а также внедрять новые стратегии в диагностике разных форм иммунопатологии.

Основные положения, выносимые на защиту:

  1. Изменения клеточных и гуморальных показателей секреторного иммунитета мукосаливарной зоны ротовой полости у ветеранов боевых действий, полученные при комплексном иммунологическом обследовании, зависят от возраста индивидуума.

  2. Пожилой и старческий возраст характеризуется доминированием врожденных факторов защиты слизистых и изменением типа регуляции иммунного ответа на Th2-антителоопосредованный.

  3. Биомаркеры иммунологического старения саливарной зоны ротовой полости у ветеранов боевых действий позволяют оценить соответствие совокупности иммунологических показателей определенному возрастному отрезку онтогенеза.

Внедрение результатов в практику

Результаты диссертации внедрены в диагностическую работу Государственного бюджетного учреждения здравоохранения Челябинского областного клинического терапевтического госпиталя ветеранов войн. Основные положения работы внедрены в учебный процесс кафедры иммунологии и аллергологии Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития России».

Апробация диссертации

Основные положения и результаты исследования по теме диссертации доложены и обсуждены на: Сибирской научно-практической конференции «Актуальные проблемы геронтологии и гериатрии» (Новосибирск, 2011); Всероссийской научно-практичестической конференции с международным участием «Дни иммунологии в Сибири» (Абакан, 2011); Всероссийском конгрессе с международным участием «Психосоциальные факторы и внутренние болезни: состояние и перспективы» (Новосибирск, 2011); IX Российской конференции иммунологов Урала (Челябинск, 2011).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, в том числе 4 из перечня изданий рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 149 страницах, состоит из введения, обзора литературы, 2 глав собственных исследований, заключения, выводов, иллюстрирована 6 рисунками и 24 таблицами. Список цитированной литературы содержит 187 источника, в т.ч. 74 отечественных и 113 зарубежных.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Данное исследование проводилось на базе стоматологического отделения Государственного бюджетного учреждения здравоохранения Челябинского областного клинического терапевтического госпиталя ветеранов войн ( ГБУЗ ЧОКТГ ВВ ) и лаборатории воспаления Учреждения Уральского отделения Российской академии наук научно исследовательского института иммунологии и физиологии. Учреждение ГБУЗ ЧОКТГ ВВ является специализированным лечебным учреждением, оказывающим поликлиническую и стационарную медицинскую помощь лицам, принимавшим участие в боевых действиях Великой Отечественной войны (ВОВ) и современных локальных конфликтах (Афганистан, Чечня, Северный Кавказ и др.). Период после окончания боевых действий у всех ветеранов, включенных в исследование, составил от 10 до 65 лет. Максимальным он был в группе ветеранов ВОВ. Отбор участников исследования проводился согласно следующим критериям:

- пол – мужской;

- возраст пациентов согласно критериям возрастной периодизации Академии педогагических наук СССР (1965): II период зрелости (от 35 до 60 лет), пожилой (от 61 до 74 лет) и старческий (от 75 лет до 90 лет);

- cтоматологическая санация ротовой полости за 30 и более дней до забора мукосаливарного секрета для проведения иммунологических исследований;

- отсутствие острых и обострений хронических заболеваний полости рта и носоглотки в течение последних 3 месяцев (респираторные инфекции, тонзиллиты, фарингиты, стоматиты, периодонтиты, хейлиты);

-отсутствие общих инфекционных, аллергических, аутоиммунных, психических болезней, злокачественных опухолей и заболеваний системы крови, эндокринной патологии (сахарный диабет, аутоиммунный тиреоидит);

-отсутствие декомпенсированной и/или неконтролируемой патологии сердечно-сосудистой системы, пищеварительной, бронхолегочной системы, гепатобилиарного, урогенитального тракта;

- информированное согласие пациента на проведение обследования;

- отсутствие вредных привычек: курения;

- отсутствие иммунотропной терапии.

Всего для исследования было отобрано 106 мужчин, которых распределили по группам в соответствии с возрастом: 1-я группа (35-60 лет) – 40 человек, средний возраст 45,1±3,9 лет, 2-я группа (61-74 года) – 30 человек, средний возраст 63,4±5,6 года и 3-я группа (75-90 лет) – 36 человек, средний возраст 81,1±1,6 год.

Перед проведением блока иммунологических исследований все пациенты прошли клинико- инструментальное обследование, которое включало сбор анамнеза, осмотры врачей специалистов (терапевт, невролог, хирург, уролог, стоматолог), по показаниям: общеклинические анализы крови, мочи, определение глюкозы, липидов крови, функциональные пробы печени и почек), ЭКГ, УЗИ, рентген, УЗДГ сосудов головы, ТКДГ, Эхо-КГ. Стоматологическое обследование пациентов проводилось по методике, разработанной Центральным научно-исследовательским институтом стоматологии (1979).

Методической особенностью работы явилось использование для иммунологических исследований неинвазивных методов забора биологического материала. Мукосаливарный секрет собирали без стимуляции слюноотделения, натощак в утренние часы до полоскания рта водой методом накопления в ротовой полости и последующего опорожнения каждые 60 секунд через воронку в полистироловые пробирки, размером 12*75 мм (BD Catalog № 352058) с дальнейшей фильтрацией через пористые фильтры фирмы Becton Dickinson диаметром пор 70 и 35 мкм (Cat.№ 340607; 340590).

Иммунологическое обследование включало цитофлюориметрическое определение клеточного состава мукосаливарного секрета, которое проводилось на проточном цитофлуориметре BD FACSCanto II с программным обеспечением «BD Facs Diva» с помощью наборов моноклональных антител (МКАТ), меченых флуоресцентными красителями 4-х видов: Fluorescein izotyocyanat (FITC); Phycoerytrin (PE); Perpidin chlorofhyll protein (PerCP); Allophycocyanin (APC), серии MultiTest, витальность определяли с применением красителя 7-AAD. Для контроля работы прибора, настройки напряжения и компенсации флуоресценции применяли набор «BD FACS 7-color setup beads». Лейкоцитарный гейт детектировали с помощью определения панлейкоцитарного маркера CD45+ (определяли все 4 изоформы: CD45RO, CD45RA, CD45RB, CD45RC) в сочетании с другими дифференцировочными маркерами лейкоцитов: CD45+CD14+CD13- (гранулоциты), CD45+CD13+CD14- (моноциты/макрофаги), CD45+CD3+CD4+ (Т-хелперы), CD45+CD3+CD8+ (Т-цитотоксические), CD45+CD19+(В-лимфоциты), CD45+CD16+56+(NK-клетки), CD45+CD13+CD11b+ (гранулоциты с экспрессией β2-субъединиц интегринов), CD45+CD14 +CD11b+(моноциты/макрофаги с молекулами адгезии). К жизнеспособным лейкоцитам относили все клетки, отрицательные по 7-AAD и положительные по CD45+. Изучение гуморальных показателей мукосаливарного секрета включало определение количества белка и муцина с помощью тест-системы ЭКО-СЕРВИС КлиниТест-БМ ПГК с пирогаллоловым красным. Уровень общей активности комплемента в мукосаливарном секрете определяли по 50% гемолизу (Резникова Л.С., 1967, Кэбот Е. и Мейер М., 1968). Количество растворимых иммунных белков в секрете определяли непрямым иммуноферментным методом с применением стандартных тест-систем: уровень sIgA, общий IgE, общий IgG, субклассы IgG1-G4 (ЗАО ВЕКТОР-БЕСТ г. Новосибирск); количество анафилатоксинов С3а и С5а (Цитокин, Санкт-Петербург); уровни регуляторных цитокинов: IL-4, IL-8, IL-17, TNF-α (ЗАО ВЕКТОР-БЕСТ, г. Новосибирск); IL-12 (Bender MedSystems GmbH Vienna, Austria); количество молекул семейства интерферонов: IFN-γ, IFN-α (ЗАО ВЕКТОР-БЕСТ г. Новосибирск); ростковых факторов: TGF-β (Invitrogen Corporation, Camarillo, CA); молекул эндогенной тревоги-аларминов: IL-1β, лактоферрин (ЗАО ВЕКТОР-БЕСТ, г.Новосибирск).
  1   2   3

Похожие:

Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология iconЗакон о дополнительных мерах социальной поддержки инвалидов и ветеранов боевых действий
Афганистане, ветеранов боевых действий в Афганистане, членов семей погибших (умерших) инвалидов боевых действий в Афганистане и ветеранов...
Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология iconСовершенствование лабораторной иммунодиагностики вич-инфекции 14. 03. 10 клиническая лабораторная диагностика 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология
Санкт-Петербургское государственное учреждение здравоохранения «Клиническая инфекционная больница имени С. П. Боткина» и фгвоу впо...
Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология iconклиническая аллергология и иммунология
Приказ Высшей аттестационной комиссии Республики Беларусь от 10 сентября 2010 г. №183
Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология iconКлинико-иммунологические особенности и стратификация риска у больных злокачественными лимфомами 14. 03. 09 Клиническая иммунология, аллергология 14. 01. 04 Внутренние болезни
Клинико-иммунологические особенности и стратификация риска у больных злокачественными лимфомами
Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология iconОбразовательный стандарт послевузовской профессиональной подготовки специалистов Специальность: №040102 «Аллергология и иммунология»
Образовательный стандарт послевузовской профессиональной подготовки врача по специальности «аллергология и иммунология», образовательные...
Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология iconАллергия к "нежалящим" насекомым (распространенность, клиническая характеристика, специфическая диагностика и аллерген-специфическая иммунотерапия) 14. 00. 36 аллергология и иммунология
Распространенность, клиническая характеристика, специфическая диагностика и аллерген-специфическая иммунотерапия
Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология iconХарактеристика клинико-иммунологических показателей и особенности возрастной эволюции атопических болезней у детей
Для детей с сочетанными формами атопических болезней, причем независимо от вариантов их сочетания, характерны значительные нарушения...
Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология iconИнформация о размерах
Члены семей погибших (умерших) инвалидов войны, участников ВОВ и ветеранов боевых действий
Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология icon«О состоянии и проблемах правового регулирования социальной защиты ветеранов Великой Отечественной войны, боевых действий и членов их семей»

Возрастные особенности иммунологических показателей мукосаливарного секрета у ветеранов боевых действий 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология iconИммунологические аспекты формирования вакцинального т-клеточного ответа у больных рассеянным склерозом 14. 03. 09 Клиническая иммунология, аллергология
Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте клинической иммунологии Сибирского...
Разместите кнопку на своём сайте:
ru.convdocs.org


База данных защищена авторским правом ©ru.convdocs.org 2016
обратиться к администрации
ru.convdocs.org