Утверждены Минздравом СССР 8 июня 1989 г. N 5013-89 МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДРОППА В СЕМЕНАХ
ХЛОПЧАТНИКА И ВИНОГРАДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ <*> -------------------------------- <*> Разработаны Н.А. Грузинской, К.Ф. Новиковой, Л.М. Шехтман (ВНИИХСЗР). Краткая характеристика препарата дана в Методических указаниях N 2807-83. Принцип метода. Метод основан на извлечении дроппа из анализируемого объекта
этилацетатом, очистке экстракта перераспределением в соляную кислоту, а затем, после
подщелачивания раствора, - в этилацетат и определении дроппа методом ТСХ. Метрологическая характеристика метода. Предел обнаружения в хроматографической пробе 0,03
мкг. Предел определения в семенах хлопчатника 0,025, винограде 0,001 мг/кг. Среднее значение
определения стандартных количеств дроппа при n = 13 для семян хлопчатника 85 +/- 12%; при n = 30
в винограде 77 +/- 5,6%. Доверительный интервал (при p = 0,95, n = 5), %: для семян хлопчатника +/-
15, винограда +/- 7%. Избирательность метода. Метод селективен. Хлор- и фосфорорганические пестициды,
применяющиеся в хлопководстве и виноградарстве, определению не мешают. Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. Гексан х.ч. Этилацетат свежеперегнанный х.ч. Гидроксид
натрия 4 н. Сульфат натрия безводный х.ч. Хлороводородная кислота 0,1 н. Ледяная уксусная кислота
5-процентная. Пластинки "Силуфол". Стандартный раствор дроппа в ацетоне концентрацией 10 и
100 мкг/мл. Бромфеноловый реагент (растворяют 0,05 г бромфенолового синего в 10 мл ацетона и
доводят до 100 мл 0,5-процентным раствором азотнокислого серебра в смеси ацетон-вода (3:1).
Раствор хранят в темноте в прохладном месте. Раствор стабилен в течение 2 недель. Приборы, аппаратура и посуда. Хроматографическая камера. Аппарат для встряхивания.
растворителей гексан-ацетон (4:3) за 1 ч до начала хроматографирования для насыщения парами
растворителей. Уровень подвижных растворителей в камере не должен превышать 0,7 - 1 см от
уровня дна камеры. Хранение проб. Срок хранения проб 3 мес. Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд. Ход анализа. Пробу семян измельчают с помощью кофейной
мельницы до размера частиц, равного размеру частиц манной крупы. Виноград
измельчают ножницами. Навеску семян (20 г) или винограда (30 г)
помещают в плоскодонную колбу на 250 мл, заливают этилацетатом (100 мл) и
оставляют на ночь. Утром экстракт фильтруют через бумажный фильтр "синяя
лента" в круглодонную колбу на 250 мл. Экстракцию повторяют еще дважды
этилацетатом порциями по 75 мл, встряхивая по 15 мин. Из объединенного
экстракта этилацетат полностью отгоняют на ротационном испарителе. В колбе
остается масло в случае анализа семян или сахара при анализе винограда.
Колбу промывают 0,1 н HCl (150 мл), собирая солянокислый
раствор в делительную воронку на 500 мл, и дважды промывают гексаном
порциями по 30 мл, встряхивая по 5 мин. В случае анализа винограда к
солянокислому экстракту добавляют 150 мл дистиллированной воды. После второй
промывки гексаном солянокислый раствор фильтруют через бумажный фильтр
"синяя лента". Гексановый слой отбрасывают. К солянокислому раствору
добавляют 4 мл 4 н раствора едкого натра до pH 10 и дропп трижды
экстрагируют этилацетатом порциями по 50 мл. Этилацетатный экстракт сушат над
безводным сульфатом натрия, фильтруют в круглодонную колбу на 250 мл и с
помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель.
Сухой остаток после удаления растворителя смывают со стенок колбы
количественно 2 - 3 мл ацетона в пробирку с оттянутым кончиком. В пробирку Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд. помещают заплавленный сверху стеклянный капилляр и упаривают ацетон
нагреванием пробирки на горячей водяной бане до объема около 0,1 мл. Остаток с
помощью того же капилляра, но с отломленным заплавленным концом
наносят на хроматографическую пластинку, предварительно промытую ацетоном.
Параллельно на пластинку микрошприцем наносят серию стандартных растворов с
содержанием дроппа 2; 1; 0,5 и 0,2 мкг. Хроматограмму развивают в системе гексан-
ацетон (4:3). После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 -
12 см пластинку вынимают из камеры и оставляют при комнатной
температуре на 5 - 10 мин. для испарения растворителя, а затем хроматограмму
обрабатывают из пульверизатора раствором бромфенолового реагента. Пластинку
помещают в сушильный шкаф и выдерживают в течение 10 мин. при температуре 60 -
80 °C. После охлаждения пластинку обрабатывают 5-процентным раствором
уксусной кислоты. Дропп на пластинках проявляется в виде синих
пятен на лимонно-желтом фоне с R 0,41 +/- 0,02. f Обработка результатов анализа. Содержание дроппа (тидиазурона) в пробе (X, мг/кг) вычисляют
по формуле: A X = -, P где: A - количество дроппа, найденное в хроматографируемой пробе методом соотношения со Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд. стандартами, мкг; P - навеска анализируемой пробы, г. Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.