Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников



Скачать 330.43 Kb.
страница2/3
Дата11.10.2012
Размер330.43 Kb.
ТипМетодические указания
1   2   3

Экспресс-метод определения лактозоположительных
кишечных палочек в воде поверхностных водоисточников
хемилюминесцентным методом
Настоящие методические рекомендации устанавливают методику хемилюминесцентного

определения в 1 куб. дм воды поверхностных водоисточников лактозоположительных кишечных

палочек.
1. Принцип метода
Определение лактозоположительных кишечных палочек основано на их способности

инициировать хемилюминесценцию люминола в щелочной среде, величина интенсивности которой

пропорциональна числу клеток в анализируемой пробе.
2. Чувствительность и сущность метода определения
Определение лактозоположительных кишечных палочек выполняют на хемилюминометре ЛИК.
Нижний предел чувствительности измерения составляет 2 КОЕ/куб. см. Определению не

мешают продукты метаболизма, отмершие клетки и питательная среда.
Концентрирование кишечных палочек из воды осуществляют на мембранный фильтр с

последующим его термостатированием при температуре 45 +/- 1 °С в течение 2 часов в жидкой

питательной среде, содержащей пептон, лактозу и натрия хлорид.
3. Средства измерений, вспомогательные устройства,
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
материалы, реактивы
    3.1. Приборы
Хемилюминометр ЛИК                                  ТУ 000.000.АЖП
    3.2. Вспомогательные устройства
Дозатор пипеточный                                  ТУ 64-1-33-29
Пинцет
Батометр
Вакуумный насос
Термостат электрический с автоматическим
терморегулятором до 50 °С
Аппарат фильтровальный с диаметром
фильтрующей поверхности 35 или 47 мм
Фильтры мембранные или фильтрующие
мембраны "Владисарт" марки МФА-МА N 4 - 6,
диаметром 35 или 47 мм
Флакон из стекла объемом 1 куб. дм
Флаконы из стекла или мерные стаканы, бюксы
диаметром 50 мм и емкостью 30 - 50 куб. см
    3.3. Материалы
Бумага фильтровальная                               ГОСТ 12026
    3.4. Реактивы
Реактив на основе люминола
3% водный раствор перекиси водорода
Спирт этиловый ректификованный                      ГОСТ 5962
Вода дистиллированная                               ГОСТ 6709
Натрий хлористый                                    ГОСТ 4233
Лактоза
4. Требования по безопасности
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
4.1. При работе с реактивами и этиловым спиртом соблюдаются правила безопасности по

ГОСТ 1.005.
4.
2. При выполнении измерений с использованием прибора ЛИК соблюдают правила по ГОСТ

12.1.019 и инструкции по эксплуатации прибора.
5. Требования к квалификации оператора
К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию лаборант и опыт работы

на приборе ЛИК и прошедшие обучение в ФЦ ГСЭН МЗ РФ.
6. Условия измерения
Измерения проводят при атмосферном давлении 730 - 760 мм рт. ст., температуре окружающей

среды (20 +/- 15) °С в лабораторных и полевых условиях.
7. Подготовка и выполнение определений
7.1. Прибор ЛИК готовят к работе в соответствии с инструкцией по эксплуатации.
7.2. Приготовление рабочего реактива.
В чистую пробирку дозатором пипеточным наливают 0,3 куб. см 3% водной перекиси водорода

и прибавляют к ней 6,0 +/- 0,1 куб. см реактива.
Рабочий реактив годен для анализа в течение 24 часов с момента его приготовления.
7.3. Отбор пробы воды.
Пробу воды из поверхностного водоисточника отбирают батометром и помещают в стерильную

емкость объемом 1 куб. дм.
7.4. Приготовление жидкой питательной среды.
На аналитических весах поочередно взвешивают 5 г пептона, 5 г натрия хлористого, 5 г лактозы

и растворяют их в 1 куб. дм стерильной дистиллированной воды.
                                                             5
    Полученную  смесь  стерилизуют  при   112 °С   (0,49 х 10  Па)
12 минут.
7.5. Концентрирование микробных клеток.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
Концентрирование проводят путем фильтрования пробы через мембранный фильтр. Для этого

фильтровальный аппарат стерилизуют фламбинированием, собирают согласно инструкции и

фильтруют через него 1 куб. дм отобранной воды. Подготовку мембранных фильтров и фильтрацию

проводят согласно инструкции, прилагаемой к ним.
8. Проведение анализа
8.1. Определение величины сигнала фона питательной среды. Крышку прибора передвигают до

упора вперед, снимают крышку-дозатор, в кювету из стекла наливают 0,3 куб. см рабочего реактива и

устанавливают его в реакционную камеру. Камеру закрывают крышкой-дозатором и в ее полость,

сменив наконечник пипеточного дозатора на чистый, наливают 0,1 куб. см смеси питательной среды.

Передвигают крышку прибора до упора назад, нажимают на нее рукой и снимают показания прибора.

Анализ повторяют три раза, вычисляют среднее значение и записывают в блокнот.
8.2. Термостатирование мембранного фильтра.
Извлекают фламбинированным пинцетом из фильтровального аппарата мембранный фильтр,

помещают его в стерильный флакон нижней стороной (или в стаканчик, бюкс), куда наливают 2,0 +/-

0,1 куб. см жидкой питательной среды. Флакон (или стаканчик, бюкс) закрывают крышкой и

термостатируют при температуре (45 +/- 1) °С в течение 2 часов.
8.3. Определение лактозоположительных кишечных палочек. По окончании термостатирования

флакон извлекают из термостата, всю жидкость над фильтром анализируют на приборе, как указано в

п. 8.1, из полученного сигнала вычитают сигнал фона и по градуировочному графику (см.

рекомендации по экспресс-определению ОМЧ) определяют концентрацию кишечных палочек.
Экспресс-метод определения термотолерантных
колиформных бактерий хемилюминесцентным методом
Настоящие методические рекомендации устанавливают методику хемилюминесцентного

определения в 100 куб. см воды централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения

термотолерантных колиформных бактерий.
1. Принцип метода
Определение клеток термотолерантных колиформных бактерий в воде основано на их

способности инициировать хемилюминесценцию люминола в щелочной среде, величина

интенсивности которой пропорциональна числу клеток в анализируемой пробе.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
2. Чувствительность и сущность метода определения
Определение клеток термотолерантных колиформных бактерий выполняют на

хемилюминометре ЛИК.
Концентрирование микробных клеток из воды осуществляют на мембранный фильтр с

последующим его термостатированием при температуре (45 +/- 1) °С в течение 2 часов в жидкой

питательной среде, содержащей пептон, лактозу и NaCl.
Нижний предел чувствительности измерения составляет 2 КОЕ/куб. см. Определению не

мешают продукты метаболизма клеток, питательная среда и их отмершие клетки.
3. Средства измерений, вспомогательные устройства,
материалы, реактивы
    3.1. Приборы
Хемилюминометр ЛИК                                  ТУ 000.000.АЖП
    3.2. Вспомогательные устройства
Дозатор пипеточный                                  ТУ 64-1-33-29
Пинцет
Пробоотборник для отбора проб воды
Мерный стакан объемом 100 куб. см
Термостат электрический с автоматическим
терморегулированием до 50 °С
Аппарат фильтровальный с диаметром
фильтрующей поверхности 35 или 47 мм
Вакуумный насос (или инжекторное устройство)
Разовые чашки Петри диаметром 50 и менее мм
Фильтры мембранные или фильтрующие
мембраны "Владисарт", марки МФА-МА
N 4 - 6, диаметром 35 или 47 мм
Флаконы из стекла объемом 100 куб. см
Флаконы из стекла или мерные стаканы,
бюксы диам. 50 мм и емкостью 30 - 50 куб. см
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
    3.3. Материалы
Бумага фильтровальная                               ГОСТ 12026
    3.4. Реактивы
Реактив на основе люминола
3% водный раствор перекиси водорода
Вода дистиллированная                               ГОСТ 6709
Спирт этиловый ректификованный                      ГОСТ 5962
Натрий хлористый                                    ГОСТ 4233
Лактоза
4. Требования к безопасности
4.1. При работе с реактивом и спиртом соблюдают меры безопасности по ГОСТ 1.005.
4.2. При работе на приборе ЛИК соблюдают правила электробезопасности в соответствии с

ГОСТом 12.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.
5. Требования к квалификации оператора
К выполнению измерений допускаются лица имеющие квалификацию лаборант с опытом

работы на приборе ЛИК и прошедшие обучение в ФЦ ГСЭН МЗ РФ.
6. Условия измерения
Измерение проводят при атмосферном давлении 730 - 760 мм рт. ст., температуре окружающего

воздуха 20 +/- 5 °С в лабораторных условиях.
7. Подготовка к выполнению измерений
7.1. Прибор ЛИК готовят к работе в соответствии с инструкцией по эксплуатации.
7.2. Приготовление рабочего реактива.
В чистую пробирку дозатором пипеточным наливают 0,3 куб. см 3% перекиси водорода и
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
прибавляют к ней 6,0 +/- 0,1 куб. см реактива. Рабочий реактив годен для анализа в течение 24 часов

с момента его приготовления.
7.3. Отбор проб воды из системы центрального питьевого водоснабжения.
Открывают кран и дают воде свободно истекать в течение 10 минут. Затем трижды

ополаскивают три емкости для отбора проб истекающей водой и отбирают в каждую из них

поочередно по 100 куб. см с интервалом времени 1 минута между каждым отбором. Емкости

закрывают пробкой и нумеруют.
7.4. Приготовление жидкой питательной среды.
    Взвешивают   на   аналитических   весах  поочередно  по  5,0 г
пептона, лактозы и NaCl и растворяют их в  1  куб. дм   стерильной
дистиллированной     воды.    Смесь    стерилизуют    при   112 °С
          5
(0,49 х 10  Па) 12 минут.
7.5. Концентрирование микробных клеток проводят путем фильтрования проб воды через

мембранный фильтр. Для этого стерилизуют фильтровальный аппарат фламбинированием, собирают

согласно инструкции и фильтруют через него 300 куб. см отобранной для анализа воды. Подготовку

мембранных фильтров к фильтрации проводят согласно инструкции, прилагаемой к ним.
8. Проведение анализа
8.1. Определение величины сигнала фона питательной среды. Крышку прибора передвигают до

упора вперед, снимают крышку-дозатор. В кювету из стекла дозатором пипеточным наливают 0,3 куб.

см рабочего реактива, устанавливают ее в реакционную камеру прибора и закрывают крышкой-

дозатором. В полость крышки-дозатора, сменив наконечник дозатора пипеточного на чистый,

наливают 0,1 куб. см питательной среды. Крышку прибора передвигают до упора назад, нажимают на

нее рукой и с индикатора снимают его показания. Анализ питательной среды повторяют три раза,

вычисляют среднее значение и записывают его в блокнот.
8.2. Термостатирование мембранного фильтра.
Извлекают фламбинированным пинцетом из фильтровального аппарата мембранный фильтр,

помещают его нижней стороной в стерильный флакон (разовую чашку Петри, стаканчик или бюкс),

куда заливают 2,0 +/- 0,1 куб. см жидкой питательной среды. Флакон закрывают крышкой и

термостатируют при температуре (45 +/- 1) °С в течение 2 часов.
8.3. Определение термотолерантных колиформных бактерий.
По истечении времени термостатирования флакон (или стаканчик, или бюкс) извлекают из

термостата и всю жидкую фазу анализируют на приборе ЛИК, как указано в п. 8.1. Вычисляют

среднее значение сигнала. Если оно больше среднего значения сигнала фона питательной среды, то

проба анализируемой воды содержит клетки термотолерантных колиформных бактерий.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
Экспресс-метод определения общих колиформных
бактерий в воде хемилюминесцентным методом
Настоящие методические рекомендации устанавливают методику определения в 100 куб. см

воды централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения и в 1 куб. дм воды из подземного

водоисточника клеток общих колиформных бактерий.
1. Принцип метода
Определение клеток общих колиформных бактерий в воде основано на их способности

инициировать хемилюминесценцию люминола в щелочной среде, величина интенсивности которой

пропорциональна числу клеток в анализируемой пробе.
2. Чувствительность и сущность метода определения
Определение клеток общих колиформных бактерий выполняют на хемилюминометре ЛИК.

Концентрирование микробных клеток из воды осуществляют на мембранный фильтр с последующим

его термостатированием при температуре (37 +/- 1) °С в течение 2 часов в жидкой питательной

среде, содержащей пептон, глюкозу и NaCl.
Нижний предел измерения концентрации бактериальных клеток составляет 2 КОЕ/куб. см.

Определению не мешают продукты метаболизма бактерий, их отмершие клетки и питательная среда.
3. Средства измерений, вспомогательные устройства,
материалы и реактивы
    3.1. Приборы
Хемилюминометр ЛИК                                  ТУ 000.000.АЖП
    3.2. Вспомогательные устройства
Дозатор пипеточный                                  ТУ 64-1-33-29
Пинцет
Пробоотборник для отбора проб воды
Мерный стакан объемом 100 куб. см
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
Разовые чашки Петри диаметром 50 и менее мм
Термостат электрический с автоматическим
терморегулированием до 50 °С
Аппарат фильтровальный с диаметром
фильтрующей поверхности 35 или 47 мм
Вакуумный насос (или инжекторное устройство)
Фильтры мембранные или фильтрующие мембраны
"Владисарт", марки МФА-МА N 4 - 6,
диаметром 35 или 47 мм
Емкость (бутыль) объемом 1 куб. дм
Флаконы из стекла или мерные стаканы,
бюксы диам. 50 мм и емкостью 30 - 50 куб. см
Флаконы из стекла объемом 150 куб. см
    3.3. Материалы
Бумага фильтровальная                               ГОСТ 12026
    3.4. Реактивы
Реактив на основе люминола
3% водный раствор перекиси водорода
Вода дистиллированная                               ГОСТ 6709
Спирт этиловый ректификованный                      ГОСТ 5962
NaCL                                                ГОСТ 4233-77
Глюкоза, х.ч.                                       ГОСТ 6038-79
1   2   3

Похожие:

Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников iconИзмерение массовой концентрации меди флуориметрическим методом в пробах питьевой воды и воды поверхностных и подземных источников
Нпф "Люмэкс", Санкт-Петербург Е. А. Волосникова, Д. Б. Гладилович, И. Б. Любченко, Н. А
Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников iconИзмерение массовой концентрации железа общего флуориметрическим методом в пробах питьевой воды и воды поверхностных и подземных источников
Нпф "Люмэкс", Санкт-Петербург Е. А. Волосникова, Д. Б. Гладилович, И. Б. Любченко, Н. А
Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников iconФизические показатели качества воды
Температура воды поверхностных источников зависит от температуры воздуха, его влажности, скорости и характера движения воды и ряда...
Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников icon«Гидросфера. Воды суши»
Постоянный поток воды, текущий в русле и питающийся за счет поверхностных и подземных вод, называется
Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников iconПрограмма семинара «Микробиологические методы анализа воды. Обеспечение качества»
Ознакомить с организацией внутреннего контроля качества санитарно-микробиологических исследований воды согласно му 1 1057-01. Ознакомить...
Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников iconМетодические указания му 1 719-98 "санитарный надзор за применением ультрафиолетового излучения в технологии подготовки питьевой воды"
Настоящие указания устанавливают основные санитарные требования к организации обеззараживания воды методом уф-излучения при 7 использовании...
Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников iconВода в природе. Физические свойства воды. Получение чистой воды. Образовательные
Образовательные цели : способствовать формированию знаний учащихся о распространенности воды в природе, её физических свойствах и...
Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников iconКачество питьевой воды дзержинского района красноярского края
Неудовлетворительное качество питьевой воды является причиной высокого уровня заболеваемости населения инфекциями бактериальной и...
Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников iconПлата за водоснабжение: регулирование, учет и налогообложение
Водоснабжение подача поверхностных или подземных вод водопотребителям в требуемом количестве и в соответствии с целевыми показателями...
Экспресс-метод определения микробиологических показателей качества питьевой воды, воды поверхностных и подземных источников iconЭкология чистая вода – новое качество жизни
Это наглядно подтверждают исследования, Госкомэкологии рф, который проводил опрос населения оценки им качества питьевой воды. Большинство...
Разместите кнопку на своём сайте:
ru.convdocs.org


База данных защищена авторским правом ©ru.convdocs.org 2016
обратиться к администрации
ru.convdocs.org